什麼是PCR?
PCR是Polymerase Chain Reaction(聚合脢連鎖反應)的簡寫,這是在1985年所發表的一項技術,目前仍廣泛的運用在基礎科學、醫療診斷、生物技術、分子生物學等多種領域的研究上,利用小片段特殊DNA在許許多多的DNA分子中,尋找並放大某一片段,測出是否存在某一段基因。
PCR的原理:
模仿基因複製的基本原理,所有的流程皆是在PCR機器中進行。本技術大致可分為三個主要的階段:
Denature:
這一個步驟是利用高溫破壞氫鍵的原理,將雙股DNA分開成兩條單股DNA。(參照下圖步驟1)
Annealing:
接著再藉由我們所加入的兩種可以專一辨識該DNA的小片段DNA分子(我們稱為引子,primer),在合適的溫度下與原DNA形成鍵結。(參照下圖步驟1)
Extension:
在特定溫度下適量的DNA、primer、polymerase,dNTP、ATP等相互作用後,分別由兩引子端點延長此DNA(參照下圖步驟1)
Amplify:以上三過程合併記為一個輪迴(cycle),藉由調整輪迴的重複次數便可以擴大兩引子間的DNA片段,於是就大功告成嘍。(參照下圖步驟2~5)
PCR的優點:
快速、敏感度高、特異性好